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技術文章

國產核酸蛋白檢測儀的發展與性能

層析分離技術是我國高校《生化分析實驗》中的基礎實驗。70年代后期研制的“核酸蛋白檢測儀”，使用某一波長（280nm或254nm等）進行定性檢測分離，用記錄儀描譜，長期在高校實驗室使用。在我國科技人員努力下，近年來，市場上相繼出現了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦核酸蛋白檢測儀”、“雙波長電腦核酸蛋白檢測儀”、“層析-電導聯用系統”等產品，迅速應用到教學實驗、科學研究和**生產領域。
一、檢測原理
所有紫外吸收檢測器工作原理都是基于光的吸收定律---朗伯-比耳定律。該定律指出，當一束單色光(λ)輻射通過稀濃度物質溶液時，如果溶劑不吸收光，則液體的吸光度與吸光物質的濃度和光經過溶液的距離成正比。其關系式為：
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
二、層析裝置分類：
按描譜方式分有：記錄儀描譜和電腦描譜（外加采集分析器）
按檢測波長分有：單波長檢測和雙波長（多波長）同步檢測
按檢驗器分有：核酸蛋白檢測和核酸蛋白檢測、電導檢測聯用
三.傳統檢測儀：
傳統層析實驗裝置由單波長核酸蛋白檢測儀（外加電腦采集器或將電腦采集器裝入檢測儀中也屬此類）、層析柱、恒流泵、部分收集器和記錄儀等部件構成。用一種波長（如280nm或254nm等）下對已知物質（蛋白或核酸等）進行實驗檢測，高校實驗室的層析實驗裝置大多屬于此類。特點如下：
1、檢測前必須選定一種波長（280nm、254nm）進行檢測，利用物質特征波長分離已知組分。
2、要求學生在檢測前一定要先調整透過率為，然后再調整吸光度為0。學生經常會問：雖然透過率和吸光度在此點（T=，A=0）符合了A=lg(1/T)關系，但怎樣保證在測量范圍內都符合朗伯--比爾定律？
3、傳統檢測儀為保證測量讀數落在儀器有效測量范圍內，在儀器面板上都設有靈敏度選擇裝置（2.0A、1.0A、0.5A、0.2A、0.1A、0.05A等）。因此，測量前要選擇合適的靈敏度；②真正吸光度值是儀器顯示數與靈敏度的乘積；③測量中不要改變靈敏度，否則可能會帶來基線變化。
4、傳統檢測儀在不同靈敏下的測量結果均為0-10mv直流信號，將此信號輸出到記錄儀或電腦采集器。顯然，記錄紙或電腦屏上的吸光度也并非樣品實際的吸光度，也應受到儀器靈敏度的調制。
四、新型檢測儀
以對蛋白、核酸、肽等生物大分子物質的檢測、分離和純化為目的，新型層析實驗系統中的電腦核酸蛋白檢測系統具有以下特點：
1、系統智能調整吸光度到0.000，透光率到。，并在測量范圍內的吸光度和透過率嚴格符合A=Lg(1/T)。
2、單波長檢測或雙波長同步檢測。
3、系統自帶數據采集工作站，檢測、采集、軟件工作站一體化系統集成。分析軟件具有實時描譜、分析參數、圖譜保存、圖譜打印、圖譜編輯等功能，峰高、峰寬、峰面積、歸一化、保留時間、半峰寬、峰底寬、面積含量、純度、層析柱分辯率等參數。
近出現的“單波長核酸蛋白檢測_電導檢測聯用系統”、“雙波長核酸蛋白檢測_電導檢測聯用系統”和“三波長核酸蛋白檢測電導檢測聯用系統”等產品，為科學研究、尋找目標物分離條件和提高工作效率了新方法。
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